Вхід на сайт

Реєстрація  |   Я забув пароль

Технічні характеристики фотометра

Щоб отримати високоякісні результати ферментативного аналізу потрібно використати відповідний фотометр з наступними технічними характеристиками:

Діапазон довжин хвиль для:  

  • ультрафіолетові тести                      340 нм, 365 нм або 334 нм
  • колориметричні тести                      492 нм, 578 нм, 405 нм
  • спектральна смуга пропускання        ≤ 10 нм
  • лінійність                                        2 одиниці оптичної щільності
  • точність                                          ± 0,001 одиниці оптичної щільності
  • тримач кювети                                1 см кювети

Всі ферментативні ультрафіолетові методи базуються на вимірюванні зростання або зменшення поглинання коензимів NADH або NADРH, що поглинають світло у довгохвильовій ділянці. Вимірювання утворення або споживання NAD(Р)H потрібно проводити при максимумі поглинання 340 нм, коли використовуються спектрофотометри або фільтрові фотометри, і при 365 або 334 нм коли використовуються фільтрові фотометри, обладнані ртутною лампою (дивись Рисунок 1).

Колориметричні методи базуються на утворенні світло-поглинаючого барвника у видимому спектрі.

Extinction - затухання

NADH - нікотинамід аденін динуклеотид в H формі

NAD - нікотинамід аденін динуклеотид

Wave length [nm] - довжина хвилі [нм]

 

Типи фотометрів

На ринку є три різні типи фотометрів:

  • Спектрофотометр
  • Спектральний лінійний фільтрофотометр
  • Фільтровий фотометр

Іо = інтенсивність падаючого світла; І = інтенсивність виміряного світла після проходження через кювету

Filter, Monochromator - фільтр, монохроматор

Cuvette - кювета

Measuring Device (photocell, multiplier) - вимірювальний пристрій (фотоелемент, фотопідсилювач)

Display - дисплей

Спектрофотометри

Джерело світла у цих приладах створює безперервний спектр. При використанні монохроматора можна вибрати бажану довжину хвилі. Проблеми можуть бути спричинені невідповідними смугами пропускання або розсіяним світловим випромінюванням.

Спектральний лінійний фільтрофотометр

Джерело світла цих приладів випромінює лінійний спектр. Бажана довжина хвилі ізолюється використовуючи простий фільтр. Довжини хвиль, які випромінює ртутна лампа, співмірні з точно визначеними фізичними константами. Тому смуга пропускання є надзвичайно вузька.

Фільтровий фотометр

Фільтровий фотометр працює з лампою розжарювання, яка випромінює безперервний спектр. Оптичний або інтерференційний фільтр ізолює потрібну довжину хвилі. Тільки фільтрові фотометри з галогенними лампами, добрими інтерференційними фільтрами і цифровим дисплеєм дозволяють провести точні виміри.

Велику кількість зразків можна обробити використовуючи обчислювальне програмне забезпечення і автоматизацію. Тому, на ринку є різні системи:

  • Спеціальне програмне забезпечення для оцінки і документування у поєднанні з традиційними фотометрами допомагає зекономити час.
  • Напівавтоматизовані системи складаються з фотометра із пристроєм заміни к'ювети і обчислювальної програми. Користувач сам повинен робити відбір піпеткою. Вимірювання і обчислення концентрації аналізованої речовини проводиться системою автоматично. Це може бути перевагою при проведенні серії аналізів.
  • Повністю автоматизований аналізатор, де не потрібен ручний відбір піпеткою